XANTOPROTEIN REAKSJON: RASJONAL, PROSEDYRE, SØKNAD

XANTOPROTEIN REAKSJON: RASJONAL, PROSEDYRE, SØKNAD

Xanthoprotein-reaksjonen bestemmer tilstedeværelsen eller fraværet av aromatiske aminosyrer som tyrosin og tryptofan, som kan danne frie eller oppløselige proteiner, peptider eller polypeptider

Takk skal du ha:

De xanthoprotein reaksjon en kjemisk prosedyre anvendt for å bestemme tilstedeværelsen eller fraværet av aromatiske aminosyrer så som tyrosin og tryptofan, som kan danne friform eller løselige proteiner, peptider eller polypeptider.

De har også blitt brukt til å oppdage giftstoffer i blodet som inneholder benzen. Denne testen kalles også xanthoprotein Becher-reaksjon.

Xanthoprotein-reaksjonen bruker konsentrert salpetersyre, varme og nøytraliserende alkali. Hvis løsningen blir gul til oransje når reaksjonen blir nøytralisert, anses analysen som positiv. Det observerte fargestoffet skyldes dannelsen av nitrogenforbindelser fra nitrifiseringen av benzengrupper.


Hvis du trenger å telle den totale mengden protein, må du bruke andre metoder for proteinbestemmelse, for eksempel Biuret.

Xanthoprotein-reaksjonen brukes hovedsakelig i analysen av stoffer med ukjent kjemisk sammensetning. Denne reaksjonen er vanligvis en del av en serie tester som hjelper til med å bestemme den kjemiske sammensetningen av et bestemt stoff eller ekstrakt. Derfor er det mye brukt av forskere.

På den annen side brukes Becher xanthoprotein-reaksjonen til å oppdage fenol- og indolstoffer i blodet, som kan forutsi utbruddet av nefropati til de neste parametrene øker.

Grunnlaget

Reaksjonen bestemmer tilstedeværelsen av benzen-gruppen, hovedsakelig i aminosyrer, så vel som i proteiner og peptider. Salpetersyre virker på benzenringen til aminosyrene den inneholder for å danne fenoliske nitroforbindelser.


Varme er nødvendig for å utføre reaksjonen, og det dannes vanligvis et bunnfall som skiller mediet i skyer og gjør det til melk. Sediment kan være hvitt eller gult. Til slutt krever det et fargesteg som fremhever farge. For dette brukes en base som 40% natriumhydroksyd eller ammoniakk.

Hvis det observeres en sterk gul farge under oppvarmingsprosessen eller en mørk oransje farge når reaksjonen rystes, tolkes reaksjonen som positiv. Aminosyrene han identifiserte, var hovedsakelig tyrosin og tryptofan.

I følge fenylalanin, selv om det er en aromatisk aminosyre, er det vanskelig å nitrere benzenkjernen til denne aminosyren i en enkel reaksjon, så den gir en negativ eller svak positiv reaksjon.

Generelt kan xanthoprotein-testen suppleres med Hopkins-Cole-testen, som brukes spesifikt til å oppdage tryptofan. Hvis xanthoprotein-testen er positiv og Hopkins-Cole-testen er negativ, er tilstedeværelsen av tryptofan i løsningen utelukket, og tilstedeværelsen av hovedsakelig tyrosin er indikert. På samme måte kan det suppleres med Millons reaksjon for å finne tyrosin og andre ting.


Denne reaksjonen kan brukes i prøver av blod, plasma eller desalbuminert serum for å oppdage uremi eller nyresvikt. I dette tilfellet søkes deteksjon av giftige stoffer (fenol og indol) forårsaket av tarmforråtnelse.

Disse stoffene inneholder en benzengruppe, så reaktanten reagerer positivt på xantoprotein, selv om det verken er en aminosyre eller et protein.

Prosess

– Xantoproteinreaksjon for påvisning av aromatiske grupper og aminosyrer

Overfør 1 ml av prøven til et rent, tørt prøverør.

Tilsett -0,5 ml konsentrert salpetersyre.

– Inkuber blandingen i et vannbad ved 70 ° C i 2 minutter. Forbered et vannbad ved denne temperaturen på forhånd.

– Når du tar røret ut av vannbadet, kan du se at løsningen blir til melk og blir en viss gulhvit farge.

– Løsningen avkjøles ved å la kaldt vann ligge i bunnen av røret.

– Tilsett (dråpe for dråpe) gradvis 40% natriumhydroksydoppløsning til stoffet endrer farge.

– Hvis testen er positiv, vises en mørk oransje ring mellom væskene.

– Hvis reaksjonen er negativ, vil ingen farge vises.

– Reaksjonen av xanthoprotein for å oppdage fenol og indol i blodet

– Isoler 5 cc 20% trikloreddiksyre i venøst ​​blod, plasma eller serum, det nest mest angitte. Bland godt og filtrer.

– 2 cm filtrat oppnås og blandes med 0,5 cm salpetersyre. Deretter varmes det opp til det koker, ettersom dette røret plasseres direkte på flammen i 30 sekunder. Den avkjøles med vann og 1,5 til 33% natriumklorid tilsettes til den.

Det tolkes slik:

-Negativt resultat: oransje.

-Positivt (+) gult resultat av sitron.

– (++) gylden gul.

– (+++) fra mørk gul til brun

Det kan tolkes ved hjelp av Autenrieth referanse kolorimetrisk skala, som består av forskjellige konsentrasjoner av kaliumdikromat. Den fremstilles i 10 fortynninger med 0,03874% stamløsning. Hvert rør representerer en prosentandel.

Forklarende skalaer

Det er to skalaer for tolkning, eldgamle og moderne. Normale verdier:

Gammelt bord: 75 til 85%

Moderne bord: fra 15 til 25%

Hvis fargen på prøverøret er mellom to standardrør, gjøres en gjennomsnittlig beregning mellom de to målingene.

En standardoppløsning av kaliumdikromat fremstilles som følger: 7,9 ml 10 N kaliumdikromat veies og overføres til en 100 ml målekolbe. Bjørnene følger den kolorimetriske tabellen Autenrieth.

Bruke opp

Bruken av xanthoprotein-reaksjonen er et sett med biokjemiske tester som hjelper til med å bestemme den kjemiske sammensetningen av noen ukjente stoffer. Denne testen hjelper kjemisk analyse for å finne proteiner som inneholder benzengrupper i strukturen.

Denne reaksjonen er mye brukt av forskere i forskjellige studier av sentralstimulerende midler.

Slik sett brukte Vazquez-Jorge og hans kolleger disse og andre reaksjoner for å studere proteininnholdet i mangroveøstersvæsker. (Crassostrea rhizophorae).

Tilsvarende Rojas et al. (2009) brukte en serie tester som involverte xanthoprotein-reaksjonen for å analysere glykomakropeptider i serum sedimenter i ricotta.

På den annen side er Becher xanthoprotein-reaksjonen modifisert av Volhard og brukt til andre formål. I dette tilfellet, for å finne fenol- og indolstoffer som kan stige tidlig (uker eller måneder) før nivået av urea og gjenværende nitrogen i blodet stiger.

Disse giftige avfallene er dannet av forråtnelse av maten.

Disse stoffene akkumuleres i blodet når de elimineres ordentlig, så en positiv xanthoprotein-test kan forutsi tidlig begynnelse av nyresvikt eller uremi.

Avhengig av intensiteten til fargen, kan du bestemme hvor avansert den er. I dette tilfellet er testen kvantitativ.

Hos friske mennesker gir denne testen en svak gul farge i samsvar med tryptofan og tyrosin i blodet.

Hos pasienter med nyreinsuffisiens er xantoproteinreaksjonen sterkt positiv på grunn av tilstedeværelsen av følgende stoffer: fenol, indol, parakresol, aromatiske syrer og andre.

Forholdsregler

Denne testen skal utføres av faglærte fagfolk. Alle biologiske sikkerhetsforskrifter må vurderes fordi reagensene som brukes er etsende syrer og baser.

Hvis noen dråper salpetersyre ved et uhell kommer på huden eller neglene, blir de gule fordi begge strukturene inneholder proteiner. I tillegg oppstår alvorlige forbrenninger på hud og slimhinner.

Ved hudkontakt, vask umiddelbart med såpe og vann i minst 20 minutter.

Hvis det kommer inn i øynene dine, kan du prøve å holde dem åpne og vaske dem ofte med rent vann.

Referanser

  1. «Xanthoprotein reaksjon»Wikipedia, gratis leksikon… 2. september 2019, 17:49 UTC. 21. oktober 2019, 20:31 wikipedia.org/
  2. Vazquez-Jorge Yu, Guerra-Molina L, Quintana-Tamayo J, Ramires-Arzuaga J, Fernando-Ballesteros R, Vazquez-Jorge Yu. Fysisk-kjemiske egenskaper og proteininnhold i flytende mangroveekstrakterCrassostrearhizophorae). Kubansk kjemi, 2014; 26 (1): 66-74. Tilgjengelig på Redalyc.
  3. Rojas E, Valbuena E, Torres G, García A, Piñero M, Galindo L. Utfør GMP ved å isolere og dekke serum med trikloreddiksyre. Cient. (Maracaibo) 2009; 19 (3): 295-302. Tilgjengelig på: ve.scielo.
  4. Vásquez A. Xanthoprotein-reaksjon. Spansk klinisk journal. 1949; 35 (5): 326-327. Tilgjengelig: Elsevier
  5. Gálvez I, Gárate O. Reaksjonen til Becher og Andrews i urinoperasjoner. Urologitjeneste på et spansk sykehus. Argentine Journal of Urology 395-404

osama

osama

Legg igjen en kommentar

Din e-postadresse vil ikke bli publisert. Obligatoriske felt er merket med *